快检方法《禽肉中金刚烷胺留的快速检测 胶体金免疫层析法》解读

本文转自：中国质量报□赖卫华

2022年12月21日，市场监管总局公布了《禽肉中金刚烷胺残留的快速检测 胶体金免疫层析法》（KJ202203）等10项新的食品快检方法，该标准的详细解读如下：

一、快检方法的法律依据和重要性

食品安全快速检测方法对食品安全监管及规范食品生产经营行为是有法律依据的，正在实施的《中华人民共和国食品安全法》和《中华人民共和国农产品质量安全法》都确定了快速检测方法的法律地位。《中华人民共和国食品安全法》(2015年10月1日起施行）第一百一十二条规定：县级以上人民政府食品药品监督管理部门在食品安全监督管理工作中可以采用国家规定的快速检测方法对食品进行抽查检测。《中华人民共和国农产品质量安全法》（2023年1月1日起施行）第五十条规定：县级以上地方人民政府农业农村主管部门可以采用国务院农业农村主管部门会同国务院市场监督管理等部门认定的快速检测方法，开展农产品质量安全监督抽查检测。抽查检测结果确定有关农产品不符合农产品质量安全标准的，可以作为行政处罚的证据。国家七部门联合印发的《食用农产品“治违禁 控药残 促提升”三年行动方案》提出，要加大日常巡查检查力度，用好快速检测手段，实行精准监管；解决速测针对性不强问题，加快推进常规农兽药残留速测工作。国家市场监督管理总局已公布的40项食品快速检测方法中包括31项胶体金免疫层析法和1项荧光免疫层析法等。目前，胶体金免疫层析法是主流的快检方法，可以检测兽药残留（金刚烷胺和瘦肉精等）、农药残留（腐霉利和灭蝇胺等）、真菌毒素（黄曲霉毒素B1和呕吐毒素等）、违禁物质（孔雀石绿和三聚氰胺等）。

二、金刚烷胺胶体金免疫层析法

1.建立金刚烷胺快速检测方法的目的

金刚烷胺具有良好的抗病毒能力，曾经大量用于预防和治疗猪传染性胃肠炎和禽流感。2005年农业部发布第560号公告，金刚烷胺类等人用抗病毒药移植兽用，缺乏科学规范、安全有效的实验数据，用于动物病毒性疫病，不但给动物疫病控制带来不良后果，而且影响国家动物疫病防控政策的实施，因此禁止金刚烷胺在畜禽养殖业中的销售和流通。但是，近年来食品中金刚烷胺检出事件仍时有发生。我国先后制定了食品中金刚烷胺检测的国家标准、行业标准和地方标准。传统的仪器检测方法不仅需要昂贵的仪器设备、复杂的样品前处理过程，还需要专业的技术人员进行操作，这些不利因素使这些检测方法不适用于现场检测。为了更有效地监管金刚烷胺，保障食品安全，市场监管总局委托南昌大学牵头制定《禽肉中金刚烷胺残留的快速检测 胶体金免疫层析法》。

2.金刚烷胺快速检测方法的原理和步骤

该方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中金刚烷胺与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制抗体和试纸条中检测线（T线）上抗原的结合，从而导致试纸条的检测线与控制线（C线）颜色深浅发生变化。通过比较检测线与控制线颜色的深浅，对样品中金刚烷胺残留进行快速定性检测。

具体步骤包括：准确称取4克试样，加入样本提取剂后用乙酸乙酯萃取金刚烷胺后用样品浓缩仪吹干；加入正己烷去除干扰检测结果的脂类物质，吸取120微升液体加入金标微孔中；室温反应5分钟，滴加到检测卡的加样孔中，8分钟判定结果。

3.金刚烷胺快速检测方法的优势

该方法适用于鸡、鸭和鹅肉中金刚烷胺残留的快速定性测定，检出限为1微克/千克，假阳性率和假阴性率都低于5%，能够满足国家检测要求，与金刚烷胺的结构类似物金刚乙胺和美金刚有部分交叉反应。该方法与仪器法相比有快速简便、经济适用和方便基层的优势。

三、快速检测方法的发展趋势

在市场监管总局已公布的40项快速检测方法中，荧光免疫层析法值得特别关注。传统的胶体金试纸条检测时，只有当胶体金颗粒集聚到一定量时，人肉眼才能观察到红色的条带。而荧光标记物的荧光强度依赖于供能的强度，即样品荧光信号强度与激发信号强度成正比。如果激发信号增强，则荧光信号也增强，因而采用高强度的光源可大大增强荧光信号值，提高检测灵敏度。通过内置标准曲线，借助便携式荧光读取仪，荧光免疫层析法可以实现半定量检测，这可以有效避免胶体金试纸条通过主观判断导致的假阳性或假阴性结果。荧光微球快速检测试纸条兼具胶体金试纸条法（操作简便、成本低、检测快速）和酶联免疫吸附法（可定量）的优势，在食品安全快检领域将具有巨大的发展潜力。这项技术在江西省2022年食品安全“守、查、保”专项行动和首个食品快检省级示范实验室的建设中发挥了积极作用。

（作者单位：南昌大学食品科学与技术国家重点实验室）